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饲用纤维素酶及复合纤维素酶制备方法

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液体发酵生产纤维素酶:纤维素酶几乎能用于以植物为原料的一切加工业,在饲料添加剂、纺织业、石油开采、果蔬加工、发酵工业、造纸、中成药加工等方面有着非常广泛的用途,特别在饲养、酿酒行业需求很大,仅水洗布,国内每月就需求5000吨左右,而且目前国内该产品是缺口,每年需大量外汇进口。目前为止,我国液体发酵生产纤维素酶的企业刚刚起步,固体生产量每年不足几吨,市场需求量大。该项目生产原料为农副产品下脚料秸秆等。

 

利用酵母菌制备酸性纤维素酶的方法:其特征是在培养基中加入酵母菌种进行培养,然后经离心分离得到的上清液即为酶液,将酶液经沉淀分离可得粗酶,粗酶分离纯化,即得产品纤维素酶。所提供的酸性纤维素酶的制备方法工艺简单,成本低,所得纤维素酶对细菌纤维素,其活性高,降解效果好。


热稳定饲用纤维素酶的固态生产技术:属于饲料微生物添加剂技术领域。其特征在于: 1.毛壳菌试管斜面培养100~150hr。三角瓶种子培养150~180hr。种曲45~55℃,相对湿度83~88%的条件下自然通风培养,料层表面变为灰褐色后,停止培养。毛壳菌固态培养,培养基为麸皮,灭菌后冷却接种,按1%接种量接种,拌匀。24hr内使温度维持在40~45℃,静止培养。料层开始出现白色菌丝,48~54hr后可升到48~52℃。当温度升到54~56℃时,料层开始结块,进行间歇通风。70~72hr时翻曲一次,进行连续通风,若温度高于56℃时,通冷空气,使料温维持在48~52℃。90~120hr料层开始变淡褐色,停止通风,培养结束。进行气流干燥,至水分10.0~12.0%时结束,采用CMC法分析纤维素酶的活力。 2.产品对热稳定性:样品于烘箱处理,酶活损失率小于3%,100℃ 烘箱处理60分钟,酶活损失率小于10%。该纤维素酶最佳作用温度50~60℃。本饲用纤维素酶固态生产技术具有工艺简单、成本低的优点,用本技术方法生产的产品具有酶活热稳定好的优点。

液-固两相发酵生产饲料用高活性纤维素酶的方法:属于生物工程技术领域。选用高抗代谢物阻遏的高产纤维素酶且内切纤维素酶、外切纤维素酶、葡萄糖糖苷酶酶谱全的康宁木霉工程菌株,利用体发酵工程技术、液-固两相发酵生产纤维素酶,发酵物酶活性可达到500~700IU/g干曲,纤维素酶发酵物经系列生化工程技术,制备高纯度的纤维素酶粉,活性可达到8000~10000IU/g干粉。应用于饲料行业。在开发利用秸秆资源的的同时,无三废排出,避免秸秆焚烧对环境造成的严重污染。

高活力木本饲料复合纤维素酶制备方法:以康氏木霉为产酶菌种通过双温度培养法进行固体产酶发酵,经斜面培养、摇瓶扩大培养及采用新型固体培养基产酶固体发酵阶段,制得高活力的复合纤维素酶成品。所获得的复合酶具有活力高,酶系均衡,成本低廉,原料来源广泛,具有操作简便的特点,符合西部牧区的实际情况,适用于木本饲料或其他高纤维素原料的饲用开发。

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