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蚯蚓干粉/蚯蚓抗菌肽/蚯蚓综合利用/蚯蚓纤溶酶/蚯蚓提取氨基酸

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食用蚯蚓干粉及水解液的制作方法:先将蚯蚓促其排粪吐泥,然后洗净再进行加工。制作干粉采用超低温冷冻技术干燥再粉碎过筛即可。制作水解液是将处理过的蚯蚓浸泡在柠檬酸水溶液中,然后再加入酸性蛋白酶及纤溶酶,酶解一天后再加白砂糖继续酶解后即可过滤出水解液,再经高压灭菌可得成品。此方法制作蚯蚓干粉及水解液营养丰富无腥臭味,易存放,完全达到食用标准。

蚯蚓抗菌肽的制取方法:技术方案包括:通过将蚯蚓体自身水解酶分解成的蚯蚓提取液离心分离,入沸水浴,超滤等步骤得到蚯蚓抗菌肽粗提液;然后将粗提液通过分子筛柱层析、离子交换柱层析、脱盐等步骤进行纯化而得到蚯蚓抗菌肽。具有原材料(蚯蚓)来源广泛、制取方法简单,产品纯度高等优点。

蚯蚓纤溶酶的提取方法:是以蚯蚓为原料,流水冲洗干净,匀浆离心,上清液经热变性、硫酸铵分部盐析、透析、Sephadex G-75柱层析、DEAE-纤维素离子交换柱层析,收集酶液透析,浓缩成溶液酶。酶活力高达2080U/mg蛋白,活力回收为19%。环毛蚓纤溶酶不但能水解蛋白质底物(如酪蛋白)和酰胺及碱性氨基酸的酯(如BAEE),并且有强烈的溶解血纤维蛋白的作用。蚯蚓纤溶酶的成功提取,将为治疗血栓类疾病开拓一条有效的新途径。

蚯蚓纤溶酶的修饰酶的制备:用活化的三聚氰氯对蚯蚓血纤蛋白溶酶进行修饰,经碱性缓冲液透析后得修饰酶。修饰酶在热稳定性和pH稳定性均强于原酶,其体内半衷期是原酶的1.4倍,且具有原料来源易、价廉、投资少等优点。

固定化蚯蚓血纤蛋白溶酶的制备方法:以壳聚糖微球为载体,吸附固定蚯蚓血纤蛋白溶酶。再用戊二醛在4~8℃下交联2h,所制得的固定化蚯蚓血纤蛋白溶酶活力和活力回收率较高,分别588U/g载体和57.2%。固定化蚯蚓血纤蛋白溶酶的活力比原蚯蚓血纤蛋白溶酶的性质有明显改善。固定化蚯蚓血纤蛋白溶酶对底物的亲和力较原蚯蚓血纤蛋白溶酶提高了2.05倍,稳定性也有提高。具有原料来源易、价廉、投资少、工艺可行简便。产品能在一定时间内溶解血块,为医药应用提供了新药物。

高效稳定的蚯蚓DNA酶提取方法:此酶可将环状的质粒DNA、链状的嗜菌体DNA、鲑精DNA、小牛血清DNA降解成小核苷酸片段,化学性质稳定,最适温度在41℃左右,耐高温,90℃三小时活性无明显改变,最适pH值为5.4左右,Mn,Mg,Ba等大部分重金属离子对其有较强的激活作用,提取该酶的方法包括蚯蚓除毒、细胞破碎、盐析、脱盐、层析、凝胶过滤等六步骤,此酶生产工艺简单,产量高,成本低,化学性质稳定,易保存运输,该提取方法提取DNA酶量大,纯度高,实验设备要求简单,具有广泛的应用前景。

蚯蚓纤溶酶多种组分及其分离、纯化、制备工艺:该工艺包括(1)粗分离:蚓激酶粗品过阴离子交换层析柱,得到三个活性峰,D1,D2,D3;(2)精细纯化:D1过阴离子交换层析柱,得到三个活性峰,每个活性峰分别过疏水层析柱得到纯品:EFE-f,EFE-e,EFE-d;D2过疏水层析柱,收集活性峰过阴离子交换层析柱纯化,得到活性组分EFF-a纯品;D3过疏水层析柱得到两个活性峰:D3H1、D3H2,将D3H1过阴离子交换层析柱纯化,得到活性组分EFE-b和EFE-c纯品;将D3H2过疏水层析柱收集活性峰,得到活性组分EFE-g的纯品。优点是:能系统地获得纯度和活性都较高的蚯蚓纤溶酶的七个组分,可满足实验室规模的制备,经适当放大可适应生产规模的制备。

新的蚯蚓纤溶酶制备方法:从蚯蚓提取一种新的分子量大约是21KD的纤溶酶,并且涉及这种纤溶酶的制备方法,含有这种纤溶酶的组合物,以及这种纤溶酶在制备治疗血液栓塞疾病的药物中的用途。

蚯蚓高活性多功能系列产品制备方法:高活性多功能产品中含有:蚯蚓素、蚯蚓碱、抗菌肽、纤溶酶等20余种高活性物质。制备时选用优质鲜活蚯蚓,在酸性清水中冲洗沥干拌入淀粉和纤维。低温脱水干燥后制作成细胞级粉末,再配制各种不同的辅料,加工成高活性多功能的胶囊、片剂、外用敷料、功能茶、液体饮料、膏状护肤品等系列产品。蚯蚓高活性多功能系列产品比普通蚯蚓制品具有更高的活性和利用率。具有溶血栓、降血压、抗肿瘤、利尿平喘、防止肌肤老化、重金属解毒、改善机体微循环、促进新陈代谢、提高免疫力等多种功效。投产成本低、用途广、原料充足、工艺完善,市场潜力大,经济效益高。

蚯蚓纤溶酶基因和基因工程菌株及其构建和应用:纤溶酶基因由747核苷酸组成,编码246个氨基酸,该基因在毕赤酵母中表达出有活性的基因工程纤溶酶蛋白,发酵液活性单位超过3,390,000U/L,该基因工程纤溶酶蛋白在医疗、卫生、保健类药物的研发领域中具有广泛的用途。

蚯蚓氨基酸复合动物营养液的生产方法:包括下列步骤:a.取鲜活蚯蚓洗净后打成浆状,b.调整pH值,在36℃-50℃下水解,c.过滤后取上清液加入Fe、Zn、和Cu的无机盐,调整pH值,在50℃-94℃下进行螯合反应,d.冷却、过滤后取上清液灭菌即可,得到的氨基酸动物营养液,既含有丰富的氨基酸和微量元素,又含有诱食因子和抗菌成分,具有营养和药用的双重效果,整个蚯蚓酶解制取氨基酸的生产成本低,方法简单,易于实现批量生产。

分离蚯蚓纤溶酶单一组分的方法:特别是从中分离出一种为糖蛋白的蚯蚓3#纤溶酶组分,其分子量为24056道尔顿,与其它单组分蚯蚓纤溶酶相比较其体内溶栓作用最强,对凝血时间影响最小,可用于开发抗栓和溶栓药物。以滤纸为载体,偶联大豆胰蛋白酶抑制剂,构成蚯蚓纤溶酶亲和层析系统,通过亲和层析和梯度洗脱从蚯蚓匀浆液分离出蚯蚓3#纤溶酶组分。有益效果是由于改进了亲和层析介质,用廉价的滤纸代替昂贵的珠状琼脂糖,使生产成本大大降低,从而适合于大规模生产,另外它还具有方法简便实用的特点。

新的蚯蚓纤溶酶编码序列与用途:提供了一种基因工程改构的新的蚯蚓纤溶酶,命名为EFE-3D,及其编码该纤溶酶的多核苷酸序列。这种经基因工程修饰的纤溶酶,能够适合在酵母Pichia Pastoris中的表达,从而更适合利用重组技术来产生蚯蚓纤溶酶EFE-3D。公开了该蚯蚓纤溶酶用于治疗多种疾病的方法,如用于血栓栓塞性疾病等疾病。还提供了含该蚯蚓纤溶酶的药物组合物。

从蚯蚓中提取复合氨基酸的方法:目的是使人们从不便直接膳食的高蛋白动物中,提取得到价值昂贵的天然复合氨基酸。本方法通过原料处理—稀乙醇浸渍—乙醇回收—树脂交换—洗脱—净化—喷雾干燥工艺流程处理得到复合氨基酸,用本法提取的复合氨基酸产品符合国家有关卫生标准,其原料来源广,生产设备简单,下脚料都能回收综合利用。

蚯蚓组分综合利用的提取方法:采用全蚯蚓(包括活及干蚯蚓)加水和防腐剂自溶;然后分离提取上清液,最后将得到的上清液经至少2级超滤,得到至少三种分子量不同的制剂。用于制备治癌等物,抗血栓形成和溶解血栓的药物,及含有多种养分的高级饮料。

用蚕蛹、蝙蝠、蚯蚓制备的生物活性蛋白粉:是将按比例取出的蚕蛹、蝙蝠、蚯蚓置于含白蜡、漂白粉的清水中清洗,而后取出,再加清水洗出漂白粉,取出打浆,浆液过滤去渣、离心沉淀,沉淀物低温干燥得产品。本产品原料易得,加工工艺简单、很好地保存了原料中的活性物质,蛋白质含量达80%以上。用本产品既可制成抗癌防痨药,还可生产出高级保健品,供人食用或饮用。

利用白蚁、蚯蚓为主要原料的配制品:包括酒、口服液、胶囊剂,在原料中可加进蚕蛹。其原料配方是白蚁、蚯蚓、蚕蛹。在主要原料上可添加中药大枣、黄精、枸杞。有祛风除湿、预防感冒、增强体质、消除疲劳、补肾壮阳、健胃消炎、平肝降压,增强人体免疫功能,治疗中风后遗症、防癌抗癌,延年益寿的功效。无任何毒性和副作用。

制取蚯蚓纤溶酶的方法:采用常规的蚓体净化、提制、分离、沉淀、分离、干燥工艺步骤。其特点在于采用纯净的水为提取液,利用蚓体自溶酶自溶于一定温度范围的水中,提取液的配方为:蚯蚓∶水∶苯甲酸钠。本方法大幅度降低了蚯蚓纤溶酶的生产成本,简化了生产工艺,同时产品收率高,活性高,分别可达2.5%以上和12000国际单位/g以上。用这种纤溶酶制取的防治血栓疾病的药品,具有明显地防治栓塞性心脑血管疾病的疗效。

用蚯蚓富集保健用有机锌或硒的方法:其特征在于用含有硒化合物或锌化合物的饲料喂养蚯蚓,然后将其清洗,冷冻干燥或晒干或晾干或焙干后磨成细粉或用提取剂提取,所述的饲料中含硒、锌的重量百分数分别为0.001—0.01和0.005—0.05。按本方法富集的有机锌和硒提高了活性,有利于人体吸收,能大大降低硒或锌对人体的毒性,更为有效地防治有毒重金属中毒。

富硒或富锌蚯蚓干粉或提取物的制造方法:包括用饲料喂养蚯蚓,将蚯蚓清洗,冷冻干燥或晒干或晾干或焙干后磨成细粉或用提取剂提取,其特征是所述的饲料中含硒化合物和/或锌化合物,其含硒量、含锌量的重量百分数分别为0.001—0.01和0.005—0.05。食用本蚯蚓干粉或提取物能防治金属中毒,防治癌症,防治心、脑血管疾病和动脉硬化,抗衰老。

乙醇提取蚯蚓组织液的制备方法:它是将洗涤、浸泡、粉碎成糊状的蚯蚓浆加入乙醇,经回流、浓缩工艺后,一次性得到符合医药卫生标准的蚯蚓组织液,用于防癌、抗癌、化血栓、降血压等药物中。工艺简单、投资少、见效快。

含蚯蚓纤溶酶的抗肿瘤药剂和保健品:涉及蚯蚓纤溶酶在肿瘤治疗和/或预防上的用途以及含有蚯蚓纤溶酶的药物组合物(药剂)和保健品。蚯蚓纤溶酶能够水解纤维蛋白(原),鉴于纤维蛋白(原)与肿瘤的着床、生长及转移等密切相关,蚯蚓纤溶酶对于抑制或治疗肿瘤有优良的效果,因此可以用蚯蚓纤溶酶对肿瘤病人实施治疗或可以制成保健品用于肿瘤的预防作用。动物试验和细胞培养的结果表明,蚯蚓纤溶酶只对癌细胞有抑制作用,对正常细胞无影响。

蚯蚓提取混合氨基酸:蚯蚓体内含有多种氨基酸,其中的15种可用化学方法提取,含量最高的亮氨酸占22.2%,其次为谷氨酸占6.2%及天冬氨酸占5.0%,占2%以上的氨基酸有:缬氨酸、赖氨酸、精氨酸和丙氨酸。这种混合氨基酸可制成药品,或用于化妆品中。蚯蚓生长发育快,繁殖率高,适应性强,易于人工养殖,原料来源丰富。

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