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一种提高肝素钠收率和效价的方法

(1)选好原料是前提:虽然利用猪小肠粘膜液资源提取肝素钠,既经济又具有环保意义。但是,无论是收集肠衣加工厂的小肠粘膜液,还是购买小肠直接加工粘膜液,必须确保粘膜的新鲜,保证其不变质,不腐败。这一点是很重要的。 (2)盐解是关键:将新鲜的粘膜液移入提取锅中,按其粘膜重量的5%加入粗盐(工业级),加热搅拌。当加热到30度—40度时,用氢氧化钠(30%-40%)液调节PH值到9,加温到46—50度,保温2.5小时(持续搅拌)。然后迅速升温到90度,再次保温10—15分钟,趁热用180目尼龙布进行过滤。在整个盐解过程中,PH值要始终保持在9,否则影响肝素和蛋白质分离。 (3)吸附过程要仔细:将滤液移入吸附缸中,待过滤的粘膜液温度冷却至60度时,加入处理好的D024肝素专用吸附树脂(加入量按原来小肠粘膜量的5%)搅拌吸附6—8小时,注意搅拌速度不要太快,以使缸内液体维持转动为宜,然后用200目的尼龙布袋滤出树脂(滤液弃去),将树脂在清水中,洗至中性(PH值在6.5-7之间)。 (4)洗涤与洗脱:用6%浓度的精盐水洗涤树脂30—60分钟,滤出树脂(水弃之)。第一次洗脱,用树脂一半量的20%-24%浓度的精盐水,在搅拌下洗脱4至5小时(洗脱中随时调节PH值为7),滤出滤液,树脂再次用同样浓度的盐水搅拌洗脱2小时,第二次滤出的滤液作为下一次的洗脱液。 (5)分离蛋白质不可少:将每一次滤液用氢氧化钠调PH值为11—12之间,静止15分钟,让蛋白充分沉淀,然后将滤液妥入4—6层的滤布中进行过滤,收集滤液,滤布的渣弃去。 (6)沉淀、脱水、再干燥:将滤液PH值调到中性,加入90%以上的乙醇,使滤液的乙醇浓度达40%左右,密封沉淀20-40小时,吸出上层惭醇液(加收再用),下层即为肝素钠粗品。按多次生产的肝素钠粗品量加入8——10倍的清水溶解,将溶液PH值调至2,静止5分钟过滤,收集滤液,再将其PH值调至6.5-7;加入乙醇,使乙醇浓度达40%左右,密封20-40小时,虹吸上层乙醇液,下层为肝素钠。最后按肝素负重量的10倍加入90%以上的乙醇密封沉淀20-40小时,虹吸出上层乙醇液,下层肝素钠用双层布袋吊干,置于60-80度的烧箱中烘干或用生石灰作干燥剂吸干水份,即在肝素钠成品。 由于小肠粘膜中肝素与其他粘多糖一起,并与蛋白质结合着,因此,提取过程中下面一些影响因素,对提高肝素钠收率和效价具有至关重要的作用。 影响因素一:肠粘膜的质量。肠粘膜液质量好坏直接影响产品的收率和效价,腐败变质的粘膜还会阻塞树脂的孔径,使其交换吸附能力减弱,树脂“受污染”,所以必须采用新鲜的肠粘膜。 影响因素二:气候和水质,各地的气候不同,水质条件也不同,这对树脂的交换吸附能力和产品效价有一定影响,即在生产中产生较多的酸、碱性蛋白质等各种有机杂质,降低肝素的纯度,因此,应注意水质,尽量用清洁的自来水,有条件的可用蒸馏水或去离子水。 影响因素三:水解温度。盐解过程中,温度控制很重要,过高肝素与蛋白质不易分开,肠粘膜水解后,必须在短时间内升温到90度,时间长浆液混浊,影响树脂吸附,加外,在90度只能维持短时间,过长会破坏肝素钠分子。 影响因素四:乙醇用量。乙醇过量会使一部分小分子肝素和盐沉淀,导致产品收率高,但效价低,产品不合格且成本高,乙醇用量少,则产品效价高产率低,不经济。 影响因素五:其他试的质量。在提取过程中使用试剂原料的好坏,也会影响产品的收率。例如配制氢氧化钠液的工业烧碱,若含碳酸钠量大,在反应中可生成碳酸根离子,它可同肝素一起争压树脂,从而影响收率。所以,使用前应检查所配试剂原料的质量,这一点往往容易被忽视。 我们在实践中摸索出的这套生产肝素钠的方法,个有工艺简单,生产成本低,产品质量和产量高等特点,是一种经济实用的方法。

 
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