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一、加热除杂蛋白法：
取牛血（已加入抗凝剂）500ml，离心，使血球沉淀，然后用生理盐水洗三遍。再加入500ml蒸馏水，搅拌后容血30min 缓慢加入0.25倍体积95%的乙醇和0.15倍体积的氯仿（事先用冰浴冷却），搅拌15min，离心，取上清液。用2倍体积的冷丙酮加入于上清液中，以沉淀蛋白并离心，沉淀物用水溶解，于55度水浴中加热10min，离心，上DESE-SephadexA50离子交换柱（2.5×30cm）,梯度洗脱胎换骨，洗脱液为PH7.6，2.5mm-50mm的磷酸氢二钾——磷酸二氢钾缓冲液，流速0.2ml/min，用紫外光谱检测流出液，合并活力峰于蒸馏水中时行透析，透析彻底后置于冰冻干燥机中，干燥后即得产品。
二、磷酸氢二钾法
取牛血50ml，离心，使血球沉淀，然后用生理盐水洗三遍后加入等体积蒸蒸馏水搅拌后容血30min 再慢慢加入0.25倍体积95%的乙醇和0.15倍体积的氯仿（冰浴冷却），搅拌15min后离心取上清液。上清液中加入磷酸氢二钾（40g/100ml）溶液，搅拌使磷酸氢二钾完全溶解后置于分液漏斗中分层，收上层溶液，离心，上清液中加入场1倍体积的冷丙酮沉淀蛋白。得微带蓝绿色的沉淀，将沉淀物用PH7.6，2.5mMPKB溶解于上述缓冲液中透析，透析液上DESE-SephadexA50离子交换柱（2.5×30cm）进行梯度洗脱，洗脱液为PH7.6，2.5mm-50mm的磷酸氢二钾——磷酸二氢钾缓冲液，收集活性蛋白峰，并对蒸馏水透析，透析完后置冰冻干燥机进行冷冻干燥，即得产品。
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